一、培養基滅菌的方法有哪些
培養基配制好后，必須立即滅菌，因為如果長時間不進行滅菌，培養料內的微生物就會在料內發酵生長，從而破壞培養基內的營養成分。一般來說，培養基的滅菌方法主要有以下六種：
1、干熱滅菌
多用于耐熱器皿滅菌，例如移液管和玻璃平皿等、玻璃試管或者金屬器皿等等，可在170攝氏度滅菌2-4h，也可在200所說的滅菌0.5-1h。接種環，接種針等、涂布棒之類的實驗器材，可用酒精燈直接灼燒滅菌。
滅菌效果：滅菌效果好，能殺死一切微生物，芽孢也不例外。
注意事項：干熱滅菌過程的熱穿透效果差且比較慢，因此在烘箱內進行干熱滅菌時，不可擺放過滿；塑料、橡膠等不耐熱材質不可采用此方法滅菌；紙、棉的滅菌溫度不能超過170℃。
2、高壓蒸氣滅菌（濕熱滅菌）
通常用于實驗室大部分培養基的滅菌，亦可用在玻璃器皿上、金屬器皿滅菌。通常采用121°C高壓滅菌15-20min或116°C高壓滅菌30min，滅菌參數可以依據培養基的不同而調節。
滅菌效果：它能殺死一切微生物，芽孢也不例外。
注意事項：滅菌時冷空氣沒有排出、培養基本身含有過多的芽孢、滅菌方式不當、滅菌鍋中的物品放置過滿，均會造成滅菌的失敗；在進行容器滅菌時，容器不可密封，需與滅菌鍋內空氣流通。
3、水浴-加熱-流動蒸汽滅菌
常用于含有不耐熱成分培養基的滅菌，如XLD瓊脂等、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液等、亞硫酸鉍瓊脂等等。用流動蒸汽對培養基進行滅菌，若無對應流動蒸汽滅菌設備，既可用水浴加熱，也可用“蒸”法殺菌。
滅菌效果：能殺死微生物的繁殖體，無法殺死芽孢體，用這種方法殺菌的培養基，一般抑菌性較強，或者需要很短的時間。
注意事項：不同培養基成分耐熱性有差別，加熱時應注意，如將含有亞硒酸鹽的培養基（SC、SBG等）加熱到90°C左右，過高的加熱可導致亞硒酸氫鈉的分解，培養基變紅色，含有瓊脂的培養基可以加熱沸騰4-6次，也可以沸水浴后20-30min讓瓊脂充分溶解。
4、過濾滅菌
多用于抗生素或含有不耐熱成分的培養基滅菌，通常采用孔徑為0.22μm微孔濾膜或者濾芯過濾除菌。實驗室生產無菌空氣時亦可使用此法，采用特殊濾芯或者濾網，過濾和除菌空氣。
滅菌效果：能去除常見的細菌，真菌和芽孢體，卻無法去除支原體，病毒和其他體積微小的生物。
注意事項：使用前通常需按照說明書使濾膜或濾芯浸濕；需要嚴格遵守過濾器或者濾膜的指示，速度過快或者過濾體積過大都會造成濾膜的斷裂和除菌的失敗；黏度較大或有沉淀的培養基不適合用此方式除菌。
5、輻照滅菌
微波、紫外線、X射線、γ射線都可以進行滅菌。γ射線具有很強的穿透力，滅菌效果良好，在食品中得到了廣泛的應用、藥品行業的產品滅菌，亦多用于微生物培養基中、實驗器材的滅菌。某些特殊培養基或者添加劑成分，由于不宜采用高溫蒸汽滅菌、過濾除菌等等，可用γ射線照射滅菌。紫外線殺菌作用弱，很少有穿透力，一般只適用于實驗室內空氣或者物體表面的殺菌。
滅菌效果：γ射線具有良好的滅菌和穿透力，能殺滅一切微生物，芽孢體也不例外。
注意事項：并非所有培養基都可以采用γ射線輻照滅菌方式，一些染料或不穩定成分經輻照后會發生變化；γ射線對瓊脂有一定的損傷，所以在固體培養基滅菌的過程中，輻照劑量及瓊脂的加入量均需適當調整；玻璃制品、金屬制品一般不可采用此方法滅菌。
6、化學試劑滅菌
通常用環氧乙烷殺菌，及各種消毒劑的浸泡滅菌。環氧乙烷在平皿中曾經得到廣泛應用、對一次性醫療產品進行滅菌，卻因環境污染大，滅過菌后的制品需要較長時間放置，讓環氧乙烷散去，目前已逐漸為其他滅菌方式所代替。
滅菌效果：不同消毒劑的殺滅效果是有區別的，粗略地可以分為低效消毒劑、中，高效消毒劑。環氧乙烷是一種高效消毒劑，能殺死含有芽孢等一切微生物。
注意事項：此類滅菌方式通常會有殘留，且對環境有污染，因此一般不適合用于直接進行微生物培養相關器皿滅菌；殺菌能力越強的消毒劑，刺激性、腐蝕性、毒性往往越大，使用時需注意防護。
二、培養基滅菌用哪種方法好
培養基的滅菌方法眾多，采用不適當的滅菌方法可能會破壞培養基的質量，會改變顏色、透明度降低、pH變化等，那么哪種方法比較好呢？
由于不同微生物培養需要的培養基不同，滅菌方法的選擇方面也有所不同，一般來說，培養基的滅菌方法應按照說明書或驗證試驗參數來采用不同方法，常規的是采用濕熱滅菌，特殊要求的采用薄膜過濾等。
